Etude de l'implication des acides sialiques dans la régulation de la fusion myoblastique

Discipline

Aspects cellulaires et moléculaires de la biologie

Classification

Sciences de la vie, biologie, biochimie,

Médecine et santé

Mots-clés libres

Myogenèse, Sialyltransférases, Pax7, N-glycanes sialylés, Cellules C2C12

Mots-clés

Myogénèse

La myogenèse est un processus physiologique qui inclut la prolifération, la différenciation et la fusion des myoblastes dans le but de créer des myotubes et par conséquent des fibres musculaires. Ces processus sont régulés par les MRF (Myogenic Regulatory Factors) et par les protéines Pax3 et Pax7, membres de la famille des protéines « Paired box ». L'équilibre entre l'expression de Pax7 et de MyoD est le facteur déterminant du devenir des progéniteurs musculaires et de leur entrée en différenciation. La fusion myoblastique nécessitent aussi la présence des glycanes sur les protéines à la surface cellulaire. Nous avons démontré qu'au cours de la différenciation myoblastique a lieu une diminution de l'α2,6 sialylation associée à une baisse de l'expression du gène st6gal1. Nous avons utilisé la lignée myoblastique murine C2C12 afin d'analyser les modifications de l'α2,6 sialylation et son impact sur l'expression de Pax7 au cours de la différenciation cellulaire. C'est pourquoi, nous avons créé des clones de C2C12 qui sous-expriment st6gal1 grâce à l'introduction d'un shRNA spécifique. Les clones obtenus montrent une prolifération ralentie et une faible expression de Pax7 ainsi qu'un indice de fusion plus important. Les structures glycaniques modifiées lors de la différenciation ont été identifiées par « lectinblots » et spectrométrie de masse : les N-glycanes sialylés bi-fucosylés sont les plus impactés par la diminution de l'α2,6 sialylation en différenciation. L'indice de fusion observé dans les clones engendre une diminution de la proportion des cellules de réserve (Pax7+/MyoD-). La quasi-extinction de l'expression de Pax7 pendant la différenciation est due à la baisse de l'activation de la voie de Notch. Le KD de st6gal1 inactive la voie Smad2/3 associée à la prolifération et il active la voie Akt connue pour favoriser la différenciation. Ainsi, nous montrons que l'α2,6 sialylation est nécessaire pour la prolifération myoblastique et elle contribue à l'activation de Pax7.