La protéine-O-fucosyltransférase 1 (Pofut1) : caractérisation fonctionnelle et régulation de la voie de signalisation de Notch au cours de la myogenèse

Discipline

Biologie Sciences Santé

Classification

Sciences de la vie, biologie, biochimie,

Médecine et santé

Mots-clés libres

protéines, différenciation cellulaire, myogenèse, glycosylation, Notch, muscles

Mots-clés

Myogénèse - Thèses et écrits académiques,

Mutagénèse dirigée - Thèses et écrits académiques,

Glycosylation - Thèses et écrits académiques,

Récepteurs Notch - Dissertations académiques

La myogenèse du muscle squelettique est un processus complexe dont certaines étapes sont régulées par la voie de signalisation de Notch. Chez les Mammifères, la présence de O‑fucosylglycannes sur la partie extracellulaire des récepteurs Notch influence l'activation de la voie de signalisation. Leur synthèse débute par l'action de la O‑fucosyltransférase Pofut1. Au cours de ce travail de thèse, nous avons mis en évidence, par mutagenèse dirigée, l'implication du site conservé de N‑glycosylation N65 pour l'intégrité structurale de Pofut1. Ceci constitue un nouvel exemple de l'influence de la N‑glycosylation dans le repliement des glycoprotéines. Des analyses combinant l'utilisation de la lignée de cellules myoblastiques C2C12 et le suivi de l'expression des gènes de la myogenèse, constructeurs des O-fucosylglycannes et des acteurs de la voie de Notch, par PCR quantitative en temps réel et à haut débit, nous ont permis de proposer un modèle décrivant le fonctionnement de la voie de signalisation de Notch durant la différenciation myogénique. Ce modèle met en évidence le rôle majeur de plusieurs acteurs de cette voie de signalisation comme Dll1, Notch3, Lfng et Pofut1. Il constitue un point de départ nécessaire aux analyses de la sur- et sous-expression de Pofut1 lors de la différenciation myogénique. Dans cette perspective, nous avons construit une souche de cellules C2C12 surexprimant Pofut1. A terme, les études sur les modifications de l'expression des gènes impliqués dans la biosynthèse des O-fucosylglycannes nous permettront de connaître plus précisément, les mécanismes moléculaires qui orchestrent la voie de signalisation de Notch dans le processus de myogenèse.