Etudes des relations génotype-phénotype des enzymes du métabolisme et des transporteurs d'efflux des xénobiotiques

Discipline

Biologie Sciences Santé

Classification

Sciences de la vie, biologie, biochimie,

Médecine et santé

Mots-clés libres

cancers, phénotypes, xénobiotiques, génotypes, spectroscopie

Mots-clés

Xénobiotiques - Thèses et écrits académiques,

Génotype - Thèses et écrits académiques,

Phénotype - Thèses et écrits académiques,

Spectroscopie de masse - Thèses et écrits académiques

Dans l'organisme, la détoxification des xénobiotiques (médicaments, carcinogènes, …) fait intervenir des enzymes de métabolisme de phase I et II ainsi que des transporteurs d'efflux. Nos travaux ont porté sur plusieurs aspects des relations génotype-phénotype de ces enzymes et transporteurs. Nous avons montré que le polymorphisme fonctionnel du cytochrome P450 (CYP) 3A5 (enzyme de phase I), CYP3A5*3 n'avait pas d'effet sur le métabolisme d'un immunosuppresseur, l'évérolimus, in vitro et chez 30 patients transplantés rénaux. L'étude de l'implication des UDP-glucuronosyltransférases (UGT ; enzymes de phase II) dans le métabolisme de la buprénorphine (traitement substitutif aux opiacés) a montré que les isoformes impliquées étaient les UGT 1A1, 1A3 et 2B7. Nous avons également montré in vitro que chez les porteurs du génotype UGT1A1*1/*1, la présence d'au moins un allèle muté du polymorphisme UGT2B7 G- 842A était associée à une activité élevée de glucuroconjugaison de la buprénorphine. Nous avons développé une méthode « cocktail » pour évaluer l'activité de cinq UGTs hépatiques (1A1, 1A4, 1A6, 1A9 et 2B7) in vitro. Cette approche repose sur la mesure simultanée de l'activité enzymatique de plusieurs enzymes après incubation d'un mélange de substrats sélectifs en présence de microsomes hépatiques humains. Cette méthode a été utilisée pour évaluer l'effet inhibiteur de la buprénorphine sur l'activité de ces cinq UGT. Enfin, une étude rétrospective de l'association entre les polymorphismes génétiques des UGT 1A6, 1A7, 1A8, 1A9 et 2B7 et de transporteurs d'efflux (MDR1 et MRP2) et la survenue du cancer colorectal (CCR) a été réalisée en comparant des cas (atteints de cancer colorectal) à deux groupes de témoins (malades atteints de cancer rénal ou volontaires sains). Trois polymorphismes du gène ABCB1/MDR1 (C1236T, G2677T et C3435T) ainsi que son haplotype triplement muté sont significativement liés à une plus faible incidence du CCR. Nous retrouvons également, pour la première fois, une association entre ce cancer et certains haplotypes du gène ABCC2/MRP2. Ces travaux apportent des connaissances, d'une part sur l'impact de polymorphismes génétiques sur le métabolisme de médicaments et d'autre part sur leur implication potentielle dans le développement du CCR.