Mise en place et validation du dosage du cortisol urinaire, du cortisol salivaire et des androgènes en LC-MS/MS

Discipline

Pharmacie

Classification

Médecine et santé

Mots-clés

Spectroscopie de masse - Thèses et écrits académiques,

Androgènes - Thèses et écrits académiques,

Cushing, Syndrome de - Thèses et écrits académiques

Le dosage des hormones stéroïdiennes occupe une place importante dans le diagnostic des pathologies endocriniennes touchant l’axe hypothalamus-hypophyse-glandes surrénales. Par exemple dans le diagnostic des syndromes de Cushing, des hyper-androgénies, et de l’hypogonadisme. Ces dosages sont difficiles du fait des structures très proches de ces molécules. Les dosages RIA sont largement utilisés et offrent un couple sensibilité-spécificité satisfaisant, cependant ces techniques souffrent de leur lourdeur technique (gestion de la radioactivité, déchets, protection et suivi du personnel). Les techniques de dosage HPLC-MS/MS constituent aujourd’hui une alternative intéressante. Dans ce travail il a été question de mettre en place et de valider le dosage du cortisol libre urinaire, du cortisol salivaire, et des androgènes selon cette méthode sur deux appareils (le 5500 Qtrap de ABsciex et le Quattromicro de la société Waters). Une étape d’extraction en milieu solide (SPE) a aussi été développée afin de diminuer l’utilisation des solvants au laboratoire et d’automatiser les étapes de prétraitement nécessaires au dosage sur un système Tecan. Les résultats et conclusions de ces validations sont exposés dans ce mémoire.