Développement d’un endomicroscope multiphotonique à deux couleurs pour l’imagerie du métabolisme énergétique cellulaire
(Document en Français)
- Thèse consultable sur internet, en texte intégral. Accéder au(x) document(s) :
- https://www.theses.fr/2017LIMO0053/abes
- noembargohttps://aurore.unilim.fr/theses/nxfile/default/a88cbb13-654f-47b5-a110-cd3322103bc3/blobholder:0/2017LIMO0053.pdf
- https://theses.hal.science/tel-01698572
- Auteur
- Leclerc Pierre
- Date de soutenance
- 28-09-2017
- Directeur(s) de thèse
- Louradour Frédéric
- Président du jury
- Kermene Vincent
- Rapporteurs
- O'Connor Rodney - Fragola Alexandra
- Membres du jury
- Louradour Frédéric - Desmoulière Alexis - Lacombe François
- Laboratoire
- XLIM - UMR CNRS 7252
- Ecole doctorale
- École doctorale Sciences et ingénierie pour l'information, mathématiques (Limoges ; 2009-2018)
- Etablissement de soutenance
- Limoges
- Discipline
- Electronique des Hautes Fréquences, Photonique et Systèmes
- Classification
- Sciences de l'ingénieur
- Mots-clés libres
- Microscopie multiphotonique, Mis en forme d’impulsions femtosecondes, Imagerie endoscopique de fluorescences intrinsèques, Mesures du métabolisme énergétique cellulaire, Mesure du rapport d’oxydo-réduction optique, Biopsie optique fibrée
- Mots-clés
- Microscopie de fluorescence,
- Photonique,
- Imagerie en autofluorescence,
- Métabolisme énergétique - Imagerie
La microscopie multiphotonique est une modalité d’imagerie de pointe offrant des opportunités d’avancées remarquables en biologie mais aussi dans le domaine médical. Afin d’en exploiter pleinement le formidable potentiel au cœur même de la pratique clinique, le développement de nombreuses sondes miniaturisées à fibre optique pour l’endomicroscopie multiphotonique (EMMP) a eu lieu depuis de nombreuses années et dans de nombreux laboratoires français et étrangers. Il s’est pour l'instant confronté à des limitations majeures comme l’impossibilité de recueillir les signaux d’auto-fluorescence des tissus qui sont intrinsèquement faibles comme ceux venant des co-enzymes métaboliques NADH et FAD. Cette limitation compromet l'utilité de l’EMMP en la restreignant à une imagerie morphologique requérant un marquage exogène des tissus. Ce manuscrit présente une architecture d’EMMP permettant de dépasser cette limitation, capable de proposer une imagerie fonctionnelle du métabolisme cellulaire en temps réel, in vivo, in situ, sans marquage. Le prototype d’EMMP proposé est une amélioration du précédent, où les Grisms en réflexions sont remplacés par des Grisms en transmission, permettant d’élargir la bande spectrale d’utilisation et la transmission du système. Ce prototype voit aussi l’adjonction d’un second laser excitateur afin d’accéder aux fluorescences du NADH et du FAD. Les résultats démontrent capable que nous sommes à même d’imager les fluorescences cellulaires intrinsèques au travers de 5 mètres de fibre optique avec une résolution subcellulaire. Parmi celles-ci nous sommes capables d’exciter et de collecter spécifiquement les fluorescences du NADH et du FAD. Enfin nous détectons assez de photons pour disposer d‘informations quantitatives et donc de proposer une image du rapport d’oxydo-réduction optique en endomicroscopie.
- Type de contenu
- Text
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Pour citer cette thèse
Leclerc Pierre, Développement d’un endomicroscope multiphotonique à deux couleurs pour l’imagerie du métabolisme énergétique cellulaire, thèse de doctorat, Limoges, Université de Limoges, 2017. Disponible sur https://aurore.unilim.fr/ori-oai-search/notice/view/2017LIMO0053