Optimisation de la culture de virus de l’hépatite E et application à la quantification de l’infectiosité des particules virales infectieuses

Discipline

Pharmacie

Classification

Médecine et santé

Mots-clés

Virus de l'hépatite E,

Culture virale - Dissertation universitaire

Le virus de l'hépatite E (HEV) est un enjeu important de santé publique dans le monde. L'infection par les génotypes 3, 4 et 7 du HEV peut entraîner une hépatite chronique tandis que l'infection par le génotype 1 peut déclencher une hépatite sévère chez les femmes enceintes. Le HEV existe sous deux formes chez son hôte, une forme nue dans les selles et une forme associée aux lipides dans le sang. Peu de méthodes existent pour propager efficacement le HEV en culture et mesurer l’infectiosité des souches cliniques in vitro. Nous avons propagé l’infection de souches cliniques du HEV jusque-là difficilement cultivables en incubant les inocula sur des cellules HepG2/C3A pendant 6h à 35°C dans un milieu contenant du DMSO. Ces conditions de culture ont permis d’améliorer les performances de la technique de quantification de l’infectiosité basée sur une culture en dilution limite avec calcul de la TCID50 [tissue culture infectious dose 50]. Nous avons quantifié l’infectiosité de souches cliniques du HEV à partir de différents échantillons biologiques. Dans un système de culture d’hépatocytes polarisés en culture, nous avons montré que les particules virales infectieuses sont préférentiellement libérées au pôle biliaire. Notre technique de culture et de TCID50 pourrait avoir un impact direct sur la sécurité sanitaire grâce à la comparaison de l’infectiosité des particules virales du HEV de différents génotypes et de différentes matrices biologiques. Elle permettra d’évaluer les conditions de désactivation des particules virales dans différentes matrices comme les produits issus des dons sanguins ou les denrées alimentaires.