Source de type Probe ElectroSpray Ionization couplée à la spectrométrie de masse : application au dosage de la metformine

Discipline

Pharmacie

Classification

Médecine et santé

Mots-clés

Metformine,

Spectrométrie de masse,

Toxicologie

La metformine est un antidiabétique largement utilisé dans le traitement du diabète de type 2. Bien que rare, l’acidose lactique est une de ses complications les plus préoccupantes. La metformine peut être la source directe de l’acidose, soit être un facteur aggravant d’une acidose préexistante. Chaque contexte a une prise en charge et un pronostic différent. Il est donc nécessaire pour les laboratoires de fournir une méthode de dosage rapide de la metformine. La source de type Probe ElectroSpray Ionization couplée à la spectrométrie de masse en tandem (PESI-MS/MS) répond à cette problématique en permettant l’analyse directe et rapide, sans prétraitement. La metformine est analysée selon un mode « Multiple Reaction Monitoring ». La quantification est possible sans gamme de calibration grâce à l’utilisation d’un étalon interne deutéré (metformine-D6) et l’application d’un protocole de dilution isotopique. La préparation d’échantillon consiste à mélanger 10 μL de plasma, 1000 μL d’un mélange d’éthanol/formiate d’ammonium et 10 μL d’étalon interne à une concentration de 5 mg/L. La méthode a été entièrement validée avec 6 niveaux de concentrations allant de 0,5 mg/L à 50 mg/L. La dilution isotopique a permis d’obtenir des résultats de biais et coefficients de variation satisfaisants (min–max : −12.1 à 15.8% et 1.0–17.1%, respectivement). L’effet matrice a été totalement compensé par l’utilisation d’un étalon interne deutéré et le protocole de dilution isotopique (biais < 1%). L’étude de spécificité n’a pas mis en lumière d’interférence significative et la comparaison à des méthodes de référence a rapporté une bonne corrélation (r²>0.99). Le temps d’analyse total est alors de 19 secondes. La méthode permet donc un dosage sensible, rapide et précis de la metformine plasmatique, sans préparation d’échantillon ni droite de calibration. Elle ouvre la voie à une nouvelle approche toxicologique permettant un rendu de résultat quasi instantané et devra être extrapolé à d’autres contextes afin de montrer son utilité clinique.