Recherche de CMV par qPCR dans les différentes couches tissulaires de greffons cornéens après dissection

Discipline

Ophtalmologie

Classification

Médecine et santé

Mots-clés

Cytomégalovirus,

PCR (génétique),

Cornée -- Greffe

Introduction : Le cytomégalovirus (CMV) est tenu responsable de nombreuses manifestations oculaires inflammatoires et possède la capacité de rester latent dans certains des tissus de l’œil. Sa réactivation lors d’un contexte d’immunodépression locale telle qu’une endothélite dans les suites d’une greffe de cornée nous a poussé à le rechercher au sein des différentes couches cornéennes par qPCR. L’objectif principal de l’étude était de déterminer la localisation cornéenne dans laquelle le CMV pouvait rester latent. Les objectifs secondaires reposaient sur l’étude des cellularités tissulaires. Matériels et méthode : 75 greffons cornéens déclassés, provenant de la Banque Française des Yeux et des banques de cornées de Bordeaux et Rouen, ont été inclus dans notre étude. Après dissection des différentes couches tissulaires (épithélium, stroma et endothélium), une extraction d’ADN manuelle à l’aide du kit d’extraction DNeasy® Blood & Tissue (QIAGEN, Courtaboeuf, France) a permis de réaliser une qPCR multiplex CMV/albumine. Résultats : 62% des greffons provenaient de patients séropositifs au CMV. 75 greffons, séparés en deux groupes selon les conditions de manipulations utilisées, ont été analysés. Les résultats concernant la recherche du CMV dans le premier groupe ne sont pas interprétables, faussés par une contamination virale. Le CMV n’a été retrouvé dans aucun des greffons du second groupe. Concernant l’analyse tissulaire, un nombre médian de cellules de 10,2.105, 41,5.105 et 1,3.105 a été estimé par qPCR pour les épithéliums, stromas et endothéliums respectivement. La variation de cellularité par rapport au nombre moyen de cellules était plus importante pour les épithéliums et les endothéliums. Conclusion : La localisation exacte du CMV dans la cornée reste indéterminée et remet en cause sa latence dans un tissu cornéen sain. Des études plus puissantes et/ou plus sensibles permettraient de répondre à cette question afin d’améliorer la compréhension du cycle latence/réactivation du CMV dans les tissus du segment antérieur de l’œil.