Couplage d’une source Probe Electro-spray Ionization à un spectromètre de masse de haute résolution (PESI-HRMS) : application à la recherche de stupéfiants dans la salive

Discipline

Pharmacie

Classification

Médecine et santé

Mots-clés

Spectrométrie de masse avec ionisation électrospray,

Spectrométrie de masse,

Drogues

Lorsqu’il s’agit de contrôle routier, la loi prévoit une confirmation de la conduite d’un véhicule après usage de stupéfiants si celui-ci se révèle positif lors du contrôle. La confirmation se fait via un prélèvement salivaire de type FloqSwab® analysé en laboratoire par des méthodes de LC-MS/MS. La source de type Probe ElectroSpray Ionization (PESI) est une méthode d’ionisation ultrarapide à pression atmosphérique permettant de s’affranchir d’une séparation en chromatographie. Notre objectif était de développer une méthode de dosage des stupéfiants dans la salive en couplant une source PESI à un spectromètre de masse haute résolution (HRMS). Le travail d’optimisation a permis d’élaborer un protocole de préparation d’échantillon minime : 50 μL de salive sont mélangés dans un tampon éthanol/formiate d’ammonium. Après ajout des étalons deutérés, 10 μL sont déposés sur une plaque d’échantillonnage dans la source PESI. L’acquisition spectrale se fait selon un mode “MS/MS” avec 1 transition de confirmation par molécule. Le temps d’analyse est de 1,5 minute. Suivant la norme ISO 15189 (COFRAC), la validation a inclus notamment une détermination des limites de détection (LDD) et de quantification (LDQ), une analyse de répétabilité et reproductibilité. La méthode a été validée avec succès pour 9 molécules de la classe des opiacés, des amphétaminiques et des dérivés de la cocaïne. Notamment, les LDD étaient inférieures à 10 ng/mL, conformément aux exigences de la loi. Pour 83 échantillons réels issus de l’activité de routine du laboratoire, la méthode PESI-HRMS a retrouvé les mêmes résultats qu’une méthode de LC-MS/MS accréditée et utilisée en routine. Dans la perspective envisagée pour la poursuite de ces travaux, une méthode THC dans la salive devra être développé pour répondre complètement aux exigences de la loi concernant la surveillance de l’usage de stupéfiants dans le cadre de la conduite automobile.