Applications de la spectrométrie de masse aux études du métabolisme et à la pharmacodynamie des immunosuppresseurs

Discipline

Biologie Sciences Santé

Classification

Médecine et santé

Mots-clés libres

rein, acide mycophénolique (AMP), greffe et transplantation, pharmacocinétique, immunosuppresseurs, spectroscopie

Mots-clés

Spectroscopie de masse - Thèses et écrits académiques,

Calcineurine - Thèses et écrits académiques,

Immunophénomarquage - Thèses et écrits académiques

Ces travaux de thèse s'inscrivaient dans l'étude par la spectrométrie de masse de la pharmacodynamie, dont l'objectif est de caractériser des effets biochimiques et physiologiques des médicaments sur l'organisme : transport vers leur cible, fixation à leur cible, biotransformation, et excrétion. L'appréciation du degré de formation d'adduits covalents entre le dérivé acyl-glucuronide de l'acide mycophénolique (AcMPAG) et l'albumine sérique humaine, l'inosine monophosphate déshydrogénase ou les uridine 5'-diphosphate glucuronosyltranférases (UGT) hépatiques a été réalisée. L'utilisation de la tolmétine acyl-glucuronide (produit non disponible), comme contrôle positif serait nécessaire afin de nous permettre de recréer les conditions expérimentales de Ding et al. en 1993, confirmant ou infirmant ainsi nos résultats avec l'AcMPAG. Le phénotypage (détermination d'activités de glucuroconjugaison in vitro) des 6 UGTs hépatiques principalement impliquées dans la détoxification médicamenteuse a été mise au point grâce à une seule analyse chromatographique liquide couplée à la spectrométrie de masse (LC-MS/MS). Des études préliminaires (cinétiques et inhibition) concernant la mise en place d'un dosage de l'activité phosphatase de la calcineurine par LC-MS/MS ont été réalisées. Mais d'autres sont nécessaires afin de développer une méthode reproductible applicable en routine, qui pourra servir d'indicateur de l'efficacité des traitements administrés aux patients ciblant la voie de signalisation de la calcineurine. La recherche de candidats biomarqueurs urinaires potentiels a permis de déterminer des peptides (p) permettant de discriminer les états : stable (ST), néphropathie chronique de grade 1 (CAN1) et rejet aigu (AR) dans une population de patients transplantés rénaux. La sensibilité (Se) et la spécificité (Sp) ont été calculées pour chacun de ces peptides (ou combinaison peptidique) spécifiques d'un état de biopsie : p4 pour les patients ST avec Se = 72.7% et Sp = 74.3% ; p17-p35 pour les patients CAN1 avec Se = 76.5% et Sp = 87.5% ; et p17-p24 pour les patients AR avec Se = 91.7% et Sp = 84.4%.